脫氨甲酰基膝溝藻毒素2&3（CRM-dcGTX2&3）NRC標準品的制備

脫氨甲酰基膝溝藻毒素2&3（CRM-dcGTX2&3）NRC標準品的制備

從亞歷山大藻的實驗室培養物中分離出N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素2&3（C1&2），化學轉化為dcGTX2和dcGTX3，然后通過幾個色譜步驟純化[3]。通過LC-MSIMS[4]（圖1和圖2）和1H NMR證實了dcGTX2&3的結構和純度。使用LC高分辨率MS（LC-HRMS）對dcGTX2和dcGTX3的[m+H]*離子獲得了353.0873（CgH7N:O-S+為4=0.3ppm）的測量準確m/z。通過LC-ox-FLD[5]（圖3）、紫外毛細管電泳（CE-UV）和化學發光硝基檢測（LC-CLND）[6]進一步評估純度。

儲備溶液是通過在去離子水中稀釋純化的脫氨甲酰基膝溝藻毒素2&3（dcGTX2&3）進行定量來制備的。脫氨甲酰基膝溝藻毒素2&3（CRM-dcGTX2&3）NRC標準品溶液是通過準確稀釋未經0.5 mM HCl（pH 3.5）處理的儲備溶液來制備。將等分試樣分配到干凈的充氬琥珀色玻璃安瓿中，并立即進行火焰密封。每個安瓿含有約0.5 mL溶液。

分析方法與價值分配

脫氨甲酰基膝溝藻毒素2&3（CRM-dcGTX2&3）NRC標準品的認證值（表1）基于NRC使用兩種分析方法獲得的結果：使用caffeine（NMIA M724c）進行校準的qNMR[7]和使用CRM-dcGTX283-c作為校準劑的LC-MSI/MS。

低水平的gonyautoxin-2、gonyautosin-3（GTX2&3）和脫羧gonyautocin 1（dcGTX1）存在于CRM-dcGTX2和3d中，并通過LC-MS/MS分配信息值，并使用NRC CRM-GTX283-d進行校準（假設類似的摩爾響應）（表2）。還存在微量的氨基甲酰甘氨酰脲新-4和M5[8]（低于定量限）

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