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    NIBSC97/642百日咳博德氏桿菌抗血清(小鼠)1RR 標(biāo)準(zhǔn)品的使用

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    NIBSC97/642百日咳博德氏桿菌抗血清(小鼠)1RR 標(biāo)準(zhǔn)品的使用方法:出于實(shí)際目的,每個小瓶含有相同數(shù)量的抗血清。每個小瓶的全部內(nèi)容物應(yīng)完全溶解在0.5ml蒸餾水中,并在使用前保持溶液冷卻(例如+4°C)。建議將溶液儲存在-20°C或更低的溫度下,不要立即使用。應(yīng)避免反復(fù)冷凍和解凍。


    NIBSC97/642百日咳博德氏桿菌抗血清(小鼠)1RR 標(biāo)準(zhǔn)品的小瓶不含抑菌劑,制劑不應(yīng)假定為無菌。不應(yīng)試圖稱量冷凍干燥粉末的比例。在NIBSC使用FDA報告的用于制備美國批次1的方法制備小鼠抗血清,不同的是使用5-8周齡的NIH小鼠代替FDA使用的CD-1菌株進(jìn)行免疫。用于免疫的DTaP疫苗由Pasteur Merieux Connaught(加拿大)捐贈,據(jù)報道含有10微克/0.5毫升戊二醛滅活百日咳毒素(PT)、5微克/0.5 ml絲狀血凝素(FHA)、3微克/0.5 l百日咳肌動蛋白(PRN)、5毫克/0.5毫升菌毛混合物(Fims,2型和3型)、,15Lf破傷風(fēng)類毒素和15Lf白喉類毒素以及1.5mg AlPO3作為佐劑。用0.5ml 1:10的疫苗在0.85%NaCl中的稀釋液在三周內(nèi)腹腔內(nèi)免疫小鼠三次。第三次免疫三周后,動物終末放血,合并血清樣本。免疫球蛋白通過硫酸銨沉淀部分純化,再溶解并用0.01M磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)透析,pH7.4。PBS中的免疫球蛋白溶液在PBS中10%正常小鼠血清中稀釋1:10。將0.5ml等分溶液分配到玻璃瓶中,編號為97/642,在真空下冷凍干燥,密封并在-20°C的黑暗中儲存。


    對于ELISA平板上的初始稀釋,建議將該溶液稀釋1/50-1/100。然而,這可能因個別實(shí)驗(yàn)室而異。


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